一、检测原理
细胞凋亡晚期,染色体DNA双链断裂或单链断裂产生大量的粘性3-OH末端,在脱氧核糖核苷酸末端转移(TdT)的作用下,将荧光素/酶标记的dUTP结合到DNA的3-末端,从而可通过检测荧光完成对细胞凋亡的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(Terminal-Deoxynucleotidyl Transferase Mediated Nick End Labeling,TUNEL)
原理如图所示:
二、实验内容与方法
(一)样品处理
细胞样品:自然晾干的细胞样品固定;封闭;通透液促渗
石蜡样品:脱蜡及水化;微波或蛋白酶K修复;封闭
(二)标记反应
1、荧光标记:滴加TdT酶反应液,反应;荧光显微镜检测
2、生物素标记:滴加TdT酶工作液反应;滴加Streptavidin-HRP工作液反应;DAB显色;苏木素复染;显微镜观察拍照
结果展示
石蜡切片样本的Tunel检测
四、客户提供材料
1、新鲜或正确保存的样品(按照我们的要求提供)
2、阳性对照样品(尽量提供)
3、相关文献(可选)
五、提交给客户结果
1、客户提供的实验样本
2、实验原始数据
3、完整实验报告
六、服务项目说明
1、按照标准实验要求
1、双方签订合同后,收取70%预付后启动预实验
2、有特殊要求请咨询:400-800-8458