一、技术简介
细胞黏附主要用于判定细胞在经过各种药物处理、基因转染、敲除或培养条件改变后,细胞的黏附能力改变情况。通常可分为两类,即细胞与细胞黏附和细胞与基质黏附。细胞黏附性的改变在肿瘤转移过程中也发挥着重要作用。
恶性肿瘤具有从原发瘤分离及在体内扩散的能力,提示这些细胞在相互识别及黏附机制方面发生了改变。
二、实验流程
1、用无血清培养基RPMI-1640将Matrigel(人工基底膜胶)配制成0.04μg/μl的人工基底膜胶备用,96孔板每孔中铺Matrigel 2μg,放于超净台中风干过夜。
2、在96孔板加入适量无血清RPMI-1640细胞培养液(或PBS或生理盐水),放置60-90分钟。
3、洗去多余的胶,取培养的肿瘤细胞以1×104/孔接种在铺胶的96孔板中,设3个重复孔,放入37摄氏度5%CO2培养箱中培养24h。
4、加药和模型药,培养48h。
5、MTT检测:吸掉液体,然后每孔加入MTT 10μl,继续培养4h,吸掉液体每孔加入二甲基亚砜(DMSO)100μl,在振荡器上振荡5-10分钟,在显微镜下观察无晶体,然后在酶标仪490nm波长读取数值。
三、客户提供材料
1、新鲜或正确保存的样品(按照我们的要求提供)
2、阳性对照样品(尽量提供)
3、相关文献(可选)
四、提交给客户结果
1、客户提供的实验样本
2、实验原始数据
3、完整实验报告
五、服务项目说明
1、按照标准实验要求
1、双方签订合同后,收取70%预付后启动预实验
2、有特殊要求请咨询:400-800-8458